mi | Analytik
Abbildung 2: Ergebnisauswertung mit Scaneinheit Abbildung 3: Manuelles System mit 2 Tube Strips (16 Replikate)
Dadurch kann die Genauigkeit des Ergebnisses um ein Mehrfaches
erhöht werden. Die statistische Schwankungsbreite der
Ergebnisse ist dadurch wesentlich geringer.
7. Automatisierung: Das neue Verfahren ist durch die Möglichkeit
der automatischen Auswertung über den Farbumschlag samt Ergebnisberechnung
sowie der Verfügbarkeit verschiedener Robotiksysteme
für die Herstellung der Probenverdünnungen teil- bzw.
vollautomatisierbar. Die Software kann mit bestehenden Labordatensystemen
verknüpft werden, Probendaten von diesen übernehmen
und die Ergebnisse in der Folge für die Weiterverarbeitung
bereitstellen.
Testablauf
Für die Testdurchführung werden die Milchproben bei 80 °C im
Wasserbad für 20 min pasteurisiert und mit dem spezifischen
Nährmedium versetzt. Anschließend werden die einzelnen Verdünnungen
in die 96 Vertiefungen einer Mikrotiterplatte pipettiert
und die Platten in einem ausreichend großen Anaerobiatopf bei
Tabelle 1: Vergleich Nachweisgrenzen
28 11 2018 | moproweb.de
37 °C für 48 Stunden bebrütet. Daraufhin erfolgt die Auswertung
und Berechnung der Sporenzahl in der AmpScan Auswerteeinheit.
Abhängig von der Testanzahl kann die Durchführung halbautomatisch
mittels AMP-6000 APS Pipettierroboter der Fa. SY-LAB
(bis zu ca. 180 Proben/Tag) oder vollautomatisch mit einem Xantus
Vollrobotiksystem der Fa. Raudszus Electronics (bis zu 400
Proben/Tag) erfolgen.
Nachweis sehr
geringer Sporenzahlen möglich
Das neue Verfahren erzielt in der Grund-variante mit drei unterschiedlichen
Probemengen und 32 Replikaten pro eingesetzter
Probemenge eine untere Nachweisgrenze von 75 Sporen pro Liter
und ist bereits in dieser Konfiguration wesentlich sensitiver
als die herkömmlichen Verfahren für die Rohmilchtestung (Nachweisgrenze
180 Sporen/Liter, vgl. Tab. 1). Die neue Mini-MPN Applikation
kann aber leicht auch für die Untersuchung von bis zu 96
Replikaten pro Probe skaliert werden. Dadurch kann die Nachweisgrenze
auf bis zu 14 Sporen pro Liter reduziert werden. In dieser
VDLUFA AMP-6000 Methoden
RCM-Röhrchen autom. MPN Mikrotiterplatten Midi-Tube Version
Verdünnungen 331 1
Wiederholungen/Verdünnungen 33 29 61 6
Nachweislimit = LOD (Sporen/l) 300 75 148 6
umtersuchte Milchmenge3 ,33 ml 13,44 ml 72 ml 12 ml
Präzision (95 % Vertr. Bereich) am LOD 51 – 360 – 2.500 11 – 75 – 530 2 – 14 – 991 2 – 86 – 610
Präzision (95 % Vertr. Bereich bei 1000 Sporen/l) 300 – 1.100 – 4.200 570 – 1.000 – 1.700 760 – 1.000 – 1.300 560 – 1.100 – 2.200
Maximale Nachweisgrenze (Sporen/l)1 10.000 59.000 6.100 3.700